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更高载量、更强耐受性的琼脂糖基质Ni亲和填料——杏彩体育网 助力重组蛋白亲和纯化!

上线时段:2024-07-19预览多次:次 赛分新闻

  引言

  伴随合拼肌肤胶原组织酶赛车的坚持非常,身为最经常用的亲和标鉴,His标鉴在合拼肌肤胶原组织酶科研生产销售中的使用真的举足大小。基本概念组氨酸残基与铝合金铁离子(如Ni2+、Cu2+、Zn2+等)之間的螯合目的,固定不动化铝合金亲和层析(immobilized metal-ion affinity chromatography,IMAC)枝术己成为 His 标注蛋清酶酶分离处理纯化的最佳的选择方式方法。为对于His标鉴蛋清酶酶纯化的具体需求,赛分网络建议二款琼脂糖产品的镍亲和生物填料Agarosix MC90-NTA Ni和Agarosix MC90-Ni Excel,兼备非特男人吸出低、相结合载量高和免疫原性性强等资源优势,可大大大升高纯化时候的能力和产品。

产品介绍

  最常见的His标签贴相融合球蛋白纯化的活性炭过滤器有Ni-IDA、Ni-NTA(图1左)和Ni-TED(图1右)等废金属螯合亲和活性炭过滤器。仍然镍阳铝离子(Ni2+)共分有6个配位点可能进行螯合配位,镍阳铝离子与活性炭过滤器基本材料螯合的配十位数取决了活性炭过滤器的稳定性地域差异,具体情况生产制造中需求结合纯化需求挑选为宜的活性炭过滤器。

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图1. Ni-NTA和Ni-TED活性炭过滤器的结构表示图   Agarosix MC90-NTA Ni和Agarosix MC90-Ni Excel是同价位以6%高热塑度琼脂糖为基本材料的金属件亲和层析人工湿地悬浮组合活性炭过滤器,人工湿地悬浮组合活性炭过滤器外观兼有极高亲水,最主要程度较地尽量避免了与生物学类试样的非特异形气体吸附。Agarosix MC90-NTA Ni人工湿地悬浮组合活性炭过滤器以次氮基三乙酸(NTA)为配体螯合镍阴阳亚铁化合物,His标签纸蛋白质的载量少于50 mg/mL,可耐受力0.1 M NaOH洗涤再生能力。Agarosix MC90-Ni Excel人工湿地悬浮组合活性炭过滤器以三羧甲基乙二胺(TED)为配体螯合镍阴阳亚铁化合物,8个螯合位点可使得其谈谈镍阴阳亚铁化合物兼有太强的拘束力力,该人工湿地悬浮组合活性炭过滤器可从复运行,需不需要补充维生素镍阴阳亚铁化合物,有效拉长纯医药化工艺。详解高技术技术指标因而表1。 表1. Agarosix MC90-NTA Ni和Agarosix MC90-Ni Excel的方法规格

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性能特点

  1. 耐压优势

  对Agarosix MC90-Ni Excel使用压强软件测试,所示2结局呈现,常见线网络速度下(200-400 cm/h),在类型可用的流动量相中弹性鲍尔环填料压强情况优异,在0.6 bar前后。较高身材比例的无机相会会影响压强较高,20%工业乙醇永久保存后要衡阳雁去气速对弹性鲍尔环填料压强的会影响。

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图2. Agarosix MC90-Ni Excel负荷测试仪数据

  2. EDTA耐受性

  在100 mM EDTA状况下泡碱1 h, Agarosix MC90-Ni Excel的DBC为初使值的67.98%,竞争者Ni Excel越来越低至42.06%;相对现阶段,Agarosix MC90-Ni Excel具备有更好的的EDTA承受性。

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图3. Agarosix MC90-Ni Excel对EDTA的受性测试图片

  3. 耐碱性能

  Agarosix MC90-Ni Excel与竞争者耐偏碱性食物能试验仔细观察DBC转化(具有数据统计见图4),泡碱生活状态为1 M NaOH。泡碱试验养成塑料填料质保期检测,应该CIP生活状态0.5 M碱洗5-6 CV,约30 min,泡碱48 h等于于96次纯化检测CIP。Agarosix MC90-Ni Excel可始终维持在刚开始载量的80%以上,综合耐偏碱性食物能优质产品。

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  图4. Agarosix MC90-Ni Excel耐碱性能测试

  应用案例

  某His商品标签核蛋白图纸纯化研究实施方案   层析柱信息内容:Agarosix MC90-Ni Excel(6.6*200 mm,CV=6.842 mL)   检   测   器:UV 280 nm         样         品:某His标签设计淀粉酶腐熟液   上   样   量:40 mg/mL弹性填料

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图5. Agarosix MC90-Ni Excel纯化图谱和电泳图 (1.Marker; 2.原样; 3.流穿; 4.后动平衡; 5.柱擦洗; 6.冲洗掉)   Agarosix MC90-Ni Excel纯化His产品标签淀粉酶进行发酵液,样板冲洗掉集中授课,无特别拖尾,二手回收比率86.67%;从纯化后样板的电泳图(图5)分折推测,Agarosix MC90-Ni Excel冲洗掉后淀粉酶溶解度较高,纯化实际效果比较。

小结

  Agarosix MC90-NTA Ni塑料填料的淀粉酶载量高,耐热耐碱,可耐受性0.1 M NaOH清理降解。选使用原核淀粉酶把你想表达出来料液中没含EDTA、DTT等还原成剂或螯合剂——合拼淀粉酶、酶、植物的生长皮质激素药。   Agarosix MC90-Ni Excel生物填料具备着比最好的DTT和EDTA耐受力性,可多次重复施用100 次上面,一直施用后就能够进行用0.5 M NaOH溶剂网络刷洗,没有填写镍阴离子,且耐典型的含碱能最好,施用生命周期较长,可延长纯化学工业艺,很好的降利润。不适代替真核模式抒发料液中含EDTA、DTT等保存剂或螯合剂——并购重组血清、酶、衍生雌激素类药物。

订购信息

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注:设计金桥铜业跨接线的截面积大小为1L,5 L, 10 L, 50 L,预装柱金桥铜业跨接线的截面积大小为1mL, 4.2mL, 5 mL。
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